Dôkaz o prítomnosti Borrelia burgdorferi v tkanivách invazívneho karcinómu prsníka

Príroda Životu,
Človek Prírode

Want to Partnership with me? Book A Call

Vŕba by nemala chýba zozname prirodzených „riedidiel“ krvi

Prirodzené „riedidlá“ krvi

12 najsilnejších európskych rastlín pre zdravé cievy a dobrý prietok krvi

Abstrakt

Nedávno sa preukázalo, že Borrelia burgdorferi , pôvodca lymskej choroby, infikuje a zvyšuje invazívne vlastnosti buniek rakoviny prsníka a zároveň ovplyvňuje expresiu zápalových chemokínov (CXCL8 a CXCL10). Táto štúdia skúma prítomnosť B. burgdorferi v tkanivách invazívnej rakoviny prsníka pomocou komerčne dostupných mikročipov tkaniva rakoviny prsníka schválených FDA, ktoré pozostávajú z 350 duktálnych, 32 lobulárnych a 22 intraduktálnych invazívnych karcinómov prsníka spolu s 29 normálnymi tkanivami prsníka. Použitím fluorescenčného imunohistochemického farbenia a zobrazovania s vysokým rozlíšením zistenia odhalili, že približne 20 % invazívnych lobulárnych a duktálnych karcinómov, po ktorých nasledovalo 14 % intraduktálnych karcinómov, bolo pozitívnych na B. burgdorferi , zatiaľ čo všetky normálne prsné tkanivá boli testované negatívne. PCR analýza ďalej potvrdila prítomnosť DNA B. burgdorferi v tkanivách rakoviny prsníka. Okrem toho 25 % B. burgdorferi -pozitívnych tkanív vykazovalo expresiu oboch chemokínov, CXCL8 a CXCL10, čo nebolo pozorované v B. burgdorferi -negatívnych tkanivách. Analýza dostupných údajov o pacientoch vrátane veku poukázala na koreláciu medzi staršími pacientmi a tkanivami pozitívnymi na B. burgdorferi . Táto štúdia potvrdzuje prítomnosť B. burgdorferi v tkanivách invazívneho karcinómu prsníka a zdôrazňuje zapojenie kľúčových členov rodiny CXCL spojených so zápalovými procesmi.

Úvod

Podľa American Cancer Society sú infekčné agens spojené s 20 % všetkých druhov rakoviny [ 1 ]. V posledných rokoch boli medzi infekčnými agens bakteriálne infekcie stredobodom pre vznik a progresiu rôznych typov rakoviny. Ukázalo sa, že patogénne baktérie podporujú chronický zápal a vyhýbanie sa imunitnému systému, čo vedie k špecializovanému tkanivovému mikroprostrediu, ktoré môže viesť k zvýšenej proliferácii buniek a zvýšenému riziku tumorigenézy [ 2 ].

Najznámejším príkladom bakteriálnych infekcií vedúcich k rozvoju rakoviny je infekcia Helicobacter pylori spôsobujúca rakovinu žalúdka [ 3 , 4 ]. Okrem toho, význam rôznych patogénov pri rakovine, ako je Salmonella typhi pri rakovine žlčníka, Chlamydia spp. pri lymfóme lymfómu pľúcneho mukózneho lymfómu (MALT), Streptococcus spp. pri kolorektálnom karcinóme a chronickej infekcii a zápale prostredníctvom Chlamydia spp. a Mycoplasma spp. pri rakovine pľúc a vaječníkov, bola uznaná viacerými štúdiami [ 5 , 6 ]. Staphylococcus epidermidis a kmene Escherichia coli boli tiež nájdené pri rakovine prsníka; kauzálny vzťah však nebol pevne stanovený [ 5 , 7 ].

Nedávna mikrobiálna štúdia skúmajúca rôzne typy tkanív rakoviny prsníka identifikovala DNA podpisy niekoľkých ľudských patogénov, vrátane Borrelia burgdorferi , spirochetálnej baktérie, pôvodcu lymskej choroby [ 8 ]. Prítomnosť B. burgdorferi bola spojená so zlou prognózou. To vyvoláva otázku, či by táto spirochéta mohla hrať úlohu pri agresívnych rakovinách prsníka, keďže predchádzajúce štúdie spájali infekciu B. burgdorferi s malignitami, ako je kožný B-bunkový lymfóm a non-Hodgkinov lymfóm [ 9–11 ].

Mnoho patogénov môže preniknúť do hostiteľských buniek a využiť prostredie hostiteľského výklenku na kolonizáciu. Replikujú sa v bunkových kompartmentoch a prechádzajú cez bariéry hostiteľa pre šírenie [ 12 ]. Už skôr sa zistilo, že B. burgdorferi je schopný šíriť sa a kolonizovať do viacerých hostiteľských orgánov a tkanív, čo pomáha pri jeho patogenite a celkovom prežití [ 13 ]. Intracelulárna lokalizácia B. burgdorferi bola tiež hlásená pre rôzne bunky cicavcov, čo by mohlo pomôcť baktériám vyhnúť sa zmenám prostredia, antibiotickej liečbe a imunitnému systému hostiteľa [ 14–19 ]. Ukázalo sa tiež, že patogenita B. burgdorferi je schopná pretrvávať v rôznych tkanivách prostredníctvom mechanizmov, ktoré manipulujú s vrodenou a adaptívnou imunitnou odpoveďou spolu s interakciou hostiteľ-proteín na vyvolanie zmien vaskulárnej a extracelulárnej matrice [ 20 ].

Nedávna štúdia in vitro tiež preukázala, že B. burgdorferi môže napádať trojité negatívne bunky rakoviny prsníka vo väčšej miere ako normálne epiteliálne bunky prsníka a zvýšiť invazívny potenciál rakovinových buniek [ 19 ]. Ďalšie štúdie ukázali významnú zmenu v expresii RNA a miRNA v celom genóme po infekcii B. burgdorferi v trojnásobne negatívnom karcinóme prsníka a normálnych epiteliálnych bunkách prsníka [ 21 , 22 ]. Ovplyvnené gény boli ďalej analyzované na ich úlohu vo fyziologických procesoch, vrátane zápalu hostiteľa a signálnych dráh rakoviny. Zistilo sa, že B. burgdorferi aktívne mení bunkové odpovede tak, aby uprednostňovali dráhy spojené so zápalom a progresiou nádoru [ 23 ]. Jedným z hlavných zistení tejto štúdie bolo, že niekoľko členov rodiny chemokínov s motívom CXC, najmä CXCL8 a CXCL 10, bolo po infekcii B. burgdorferi vysoko zvýšené [ 22 ]. Proteín CXCL8, tiež známy ako interleukín 8 (IL-8), je vylučovaný bunkami vrodeného imunitného systému a slúži ako chemoatraktant na získavanie neutrofilov [ 23 ]. Na druhej strane CXCL10 vykonáva svoje funkcie prostredníctvom svojho receptora CXCR3, čím vyvoláva pleiotropné účinky, ako je stimulácia NK buniek, monocytov a migrácia T-buniek. Slúži tiež ako kľúčový regulačný faktor v kontexte „cytokínovej búrky“ [ 23 ]. Dôležitosť týchto zistení si vyžaduje ďalšie skúmanie prítomnosti B. burgdorferi v rakovinových tkanivách, aby sa hlbšie preskúmali základné procesy.

Táto štúdia je zameraná na skúmanie prítomnosti antigénu/DNA B. burgdorferi v komerčne dostupných, FDA schválených parafínových tkanivových poliach rakoviny prsníka. Lokalizácia a morfológia B. burgdorferi sa hodnotili farbením IHC v kombinácii s mikroskopickou analýzou týchto tkanív rakoviny prsníka s vysokým rozlíšením. Okrem toho boli analyzované skôr opísané zápalové markery vyvolané B. burgdorferi , ako sú CXCL8 a CXCL10, aby sa objasnili potenciálne korelácie medzi prítomnosťou B. burgdorferi a zápalovými odpoveďami hostiteľa.

Materiály a metódy

Pole tkaniva rakoviny prsníka

Komerčne dostupné tkanivové polia s rakovinou prsníka zaliate do parafínu FDA, ktoré obsahujú tkanivá rakoviny prsníka, boli zakúpené od spoločnosti US Biomax, Inc., Rockville, MD (BR2161, BN1021, BR2082, BR2082a, BR041, BR082b) a Novus Biologicals USA (NBP02)-4208 . Spolu tieto tkanivové polia obsahovali 404 prípadov pokrývajúcich všetky bežné typy tkanív rakoviny prsníka od pacientok rôznych vekových skupín s rôznymi patologickými diagnózami a stupňami nádoru. Táto štúdia tiež zahŕňala 29 normálnych tkanív rakoviny prsníka ako kontroly. Každé jadro tkaniva rakoviny prsníka malo hrúbku 5 μm a priemer 1 mm.

Imunohistochemické (IHC) farbenie

Čipy tkaniva rakoviny prsníka boli zbavené parafínu na ohrievači sklíčok počas 15 minút a nasledovali tri 5-minútové premytia xylénom pri teplote miestnosti (RT). Tkanivové pole sa potom rehydratovalo ponorením do 100, 90 a 70% metanolu na 5 minút a umiestnilo sa pod pomaly tečúcu vodu z vodovodu na 25 minút, aby sa zo sklíčka odstránili stopy alkoholu. Sklíčka sa premyli 1X fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom (PBS, Sigma-Aldrich, St. Louis. MO, USA) zmiešaným s 1 % roztokom hovädzieho sérového albumínu (Sigma-Aldrich) a destilovanou vodou, každé 5 minút. Prebytočný roztok okolo tkaniva sa jemne zotrel pomocou Kimových obrúskov. Vodný kúpeľ sa ekvilibroval na 99 °C a sklíčka sa ponorili do nádoby Coplin s predhriatym sprostredkovaným pufrom na získanie antigénu (10 mM citrát sodný, 0,05 % Tween 20, pH 6,0) na 10 minút. Nádoba Coplin sa potom odstránila z vodného kúpeľa a nechala sa 20 minút pri teplote miestnosti, aby sa ochladil pufor. Po tomto kroku nasledovalo umiestnenie sklíčok pod pomaly tečúcu vodu z vodovodu, aby sa odstránili stopy pufra citrátu sodného na 5 minút. Potom sa sklíčka premyli 3x 1x PBS + 1% BSA a destilovanou vodou, každé 5 minút.

Tkanivové rezy sa potom blokovali kozím sérom v riedení 1:200 (Thermo Fisher Scientific, Waltman, MA, USA) v 1X PBS počas 1 hodiny vo zvlhčenej komore pri teplote miestnosti. Prebytočný roztok bol jemne natretý na Kim utierku a sklíčka boli opláchnuté 1X PBS + 1% BSA a destilovanou vodou každé 5 minút. Rôzne sady sklíčok tkanivového poľa boli zafarbené na CXCL8 s použitím polyklonálnej králičej protilátky IL8/CXCL8 (Cat#A2541, ABClonal Technology, Woburn, MA, USA) a na CXCL10 s použitím polyklonálnej protilátky CXCL10 (Cat#DF6417, Affinity Biosciences, Cincinnati, OH, OH, OH USA). Obe protilátky boli pred pridaním na tkanivové sklíčka nariedené na 1:200 v 1X PBS. Sklíčka sa inkubovali pri 4 °C cez noc vo zvlhčenej komore. Nasledujúci deň boli sklíčka opláchnuté 3x 1X PBS + 1% BSA a destilovanou vodou, každé počas 5 minút. Tkanivové rezy sa potom ošetrili 1:200 riedením sekundárnej anti-králičej protilátky s fluorescenčnou červenou značkou (kozí anti-králičí IgG (H+L), konjugovaný DyLight 594, (kat. č. 35569, Invitrogen, Waltman, MA , USA) a inkubovali sa jednu hodinu pri teplote miestnosti. Prebytočný roztok okolo tkaniva bol jemne zotretý a premytý, ako je uvedené vyššie . 1:200 s 1X PBS a pridali sa ku sklíčkam. Sklíčka sa inkubovali pri 4 °C cez noc vo zvlhčenej komore.

Tkanivové rezy sa potom ošetrili 1:200 riedením sekundárnej anti-myšej protilátky s fluorescenčnou zelenou značkou (kozí anti-myší IgG (H+L), DyLight 488 konjugovaný, Cat#35502, Invitrogen) a inkubovali sa hodinu pri teplote miestnosti, potom sa premyla, ako je uvedené vyššie. Rezy sklíčka sa potom kontrastne farbili 0,1% sudánskou čiernou (Sigma) počas 20 minút pri teplote miestnosti. Sklíčka sa opäť naposledy premyli 1XPBS a potom sa namontovali pomocou upevňovacieho média Prolong Diamond Antifade s DAPI (Thermo Fisher Scientific). Snímky boli nasnímané a spracované pomocou širokopoľného fluorescenčného mikroskopu Nikon Eclipse 80i a Leica Thunder pri 200-násobnom a 400-násobnom zväčšení.

Extrakcia DNA/PCR

Genómová DNA sa extrahovala z tkanivových polí zaliatych do parafínu pomocou súpravy Qiagen AllPrep DNA/RNA FFPE Kit (Qiagen Cat# 80234, Hilden, Nemecko). Najprv boli sklíčka zbavené parafínu, ako je opísané vyššie, a tkanivá na sklíčkach boli zoškrabané pomocou sterilného skalpelu a zozbierané do sterilných mikrocentrifugačných skúmaviek. Genómová DNA sa potom izolovala použitím protokolu extrakcie DNA podľa pokynov výrobcu. Vzorky DNA boli kvantifikované pomocou BioTek (Winooski, VT, USA) Microplate Spectrophotometer.

Vzorky DNA boli testované štandardnou PCR s použitím primérov navrhnutých na amplifikáciu génov CTP syntázy B. burgdorferi s použitím publikovaných primérov [ 24 ]. Sekvencie CTP syntázy sa amplifikovali v vnorených reakciách. Priméry prvého kola boli F: 5′-ATTGCAAGTTCTGAGAATA-3′ a R: 5′-CAAACATTACGAGCAAATTC-3′ v 50 μl reakcii s tlmivým roztokom HotStarTaq (Qiagen), 25 pmolov každého priméru, MgCl2 _upravený na 2,5 mM 1,5 jednotky HotStarTaq (Qiagen, kat. č. 203203). Reakčné podmienky boli počiatočná denaturácia pri 94 °C počas 15 minút, po ktorej nasledovalo 30 cyklov 94 °C/30 s, 48 °C/30 s, 72 °C/30 s a konečné predĺženie pri 72 °C/5 min. Vnorené reakčné priméry boli F: 5′-GATATGGAAAATATTTTATTTATTG-3′ a R: 5′AAACCAAGACAAATTCCAAG-3′ v 50 ul reakcii obsahujúcej 25 pmolov každého priméru, 2,5 mM MgCl2 _, 1,5 jednotky HotStarTaq Reakčné podmienky boli počiatočná denaturácia pri 94 °C počas 15 minút, po ktorej nasledovalo 35 cyklov 94 °C/30 s, 50 °C/30 s, 72 °C/30 s a konečné predĺženie pri 72 °C/5 min. Produkty PCR sa analyzovali štandardnou technikou elektroforézy na agarózovom géli a na určenie veľkosti získaných pásov sa použil Hi-Lo DNA maker (Minnesota Molecules, Minneapolis, MN).

Sekvenčná analýza

Amplifikovaná DNA bola purifikovaná pomocou purifikačnej súpravy QIAGEN PCR (Qiagen) podľa pokynov výrobcu. Aby sa potvrdilo, že amplifikované produkty patria Borrelia spp, purifikované vzorky DNA sa poslali na sekvenovanie v oboch smeroch s priamymi a reverznými primérmi do Eurofins Genomics, Louisville, KY. Výsledky sekvenovania sa porovnávali so serverom NCBI pomocou nástroja Basic Local Alignment Search Tool (BLAST, https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi ), ktorý potvrdil údaje získané prostredníctvom PCR.

Etika

Nie je použiteľné, pretože táto štúdia používala komerčne dostupné sklíčka s tkanivom rakoviny prsníka schválené FDA.

Výsledky

Prvou časťou tejto štúdie bolo stanovenie prítomnosti B. burgdorferi v ľudských tkanivách rakoviny prsníka v komerčne dostupných súboroch tkaniva rakoviny prsníka schválených FDA s použitím techniky fluorescenčného (IHC) farbenia s B. burgdorferi sensu stricto (ss) špecifickými monoklonálnymi protilátkami .

Tkanivové sklíčka obsahovali 350 duktálnych, 32 lobulárnych, 22 intraduktálnych invazívnych karcinómov prsníka spolu s 29 normálnymi tkanivami prsníka. Výsledky IHC ukázali, že približne 20 % invazívnych duktálnych karcinómov prsníka, 19 % lobulárnych a 14 % intraduktálnych invazívnych karcinómov prsníka bolo pozitívnych na antigén B. burgdorferi, zatiaľ čo všetky normálne kontrolné prsné tkanivá boli negatívne ( Tabuľka 1 ).

Stôl 1.B. burgdorferi – pozitívne vzorky rakoviny prsníka a normálne prsné tkanivá podľa patológie tkaniva

Typ tkaniva	Percento pozitívnych vzoriek B. burgdorferi sensu stricto (%)
Invazívny duktálny karcinóm (350)	20
Invazívny lobulárny karcinóm (32)	19
Intraduktálny karcinóm (22)	14
Normálne prsné tkanivo (29)	0

Obrázok 1A a B poskytujú reprezentatívne IHC snímky pre B. burgdorferi- pozitívne a negatívne tkanivá rakoviny prsníka a normálne tkanivá z biopsie prsníka. B. burgdorferi- pozitívne tkanivá rakoviny prsníka invazívnych duktálnych a lobulárnych karcinómov, ktoré mali fluorescenčné zelené sfarbenie, sú znázornené na obr. 1A ; Panely H, K resp. B. burgdorferi – negatívne tkanivá rakoviny prsníka bez detegovateľného zeleného signálu možno vidieť na Obr. 1A ; Panely B, E. V žiadnej z kontrolných vzoriek od zdravých darcov nebolo žiadne špecifické zafarbenie B. burgdorferi ( obr. 1B ; panely B, E, H, K).

Na vizualizáciu morfológie tkaniva v rôznych bioptických vzorkách sa použila diferenciálna interferenčná mikroskopia (DIC) ( obr. 1A a B ; panely C, F, I, L). Farbenie jadier DAPI sa použilo na detekciu jadier buniek ( obr. 1A a B : panely A, D, G, J).

Rezy tkaniva rakoviny prsníka pozitívne na B. burgdorferi boli ďalej vizualizované širokopoľným fluorescenčným mikroskopom Leica Thunder v tkanivách rakoviny prsníka spolu s ich 3D distribúciou ( obr. 2 ). Zlúčené obrázky DAPI/Borrelia vizualizujú prítomnosť spirochetálnej formy spolu s niektorými agregátmi B. burgdorferi na špecifických miestach tkanív ( obr. 2 : Panely: A–D). Tkanivová morfológia rôznych bioptických vzoriek sa vizualizovala pomocou DIC ( obr. 2 ; panely E, F, G, H).

Na obr. 2 panel I demonštruje 3D obraz vytvorený pomocou Z-stackov (s použitím mikroskopie Leica Thunder) vzorky pozitívnej na B. burgdorferi ( obr. 2 , panel D), ktorý vizualizuje, že spirochéty sa agregovali vo vnútri tkaniva rakoviny prsníka.

Štúdia sa ďalej zamerala na určenie, či existujú nejaké dôkazy o zápalových stimuloch v dôsledku prítomnosti infekcie B. burgdorferi , s použitím predtým uvádzaných zápalových markerov CXCL8 a CXCL10. Získané výsledky IHC naznačujú dôkaz zápalovej reakcie lokalizovanej v blízkosti spirochét a agregátov B. burgdorferi ( obr. 3 ; panely B, C, F a G). Naopak, tkanivá rakoviny prsníka boli negatívne na B. burgdorferi ( obr. 3 ; panely D a H) a normálne tkanivá prsníka nemali žiadne detekovateľné zafarbenie CXCL8 a CXCL10 ( obr. 3 ; panely A a E).

Kvantitatívna analýza prítomnosti CXCL8 a CXCL10 na B. burgdorferi – pozitívnych a negatívnych vzorkách rakoviny prsníka so 70 prípadmi/marker ukázala, že vzorky tkaniva pozitívne na B. burgdorferi boli tiež pozitívne na oba markery v približne 25 % prípadov. Individuálne z tkanív pozitívnych na B. burgdorferi bolo 32 % pozitívnych na marker CXCL8 a 25 % bolo pozitívnych na marker CXCL10 z príslušných vzoriek tkaniva ( obr. 4 ). Je zaujímavé, že sa zistilo, že všetky vzorky tkaniva s pozitívnym zápalovým markerom sú duktálny karcinóm okrem jedinej vzorky lobulárneho karcinómu v tkanivách pozitívnych na CXCL8.

Vzorky B. burgdorferi -pozitívneho karcinómu prsníka a B. burgdorferi -negatívne normálne prsné tkanivo boli použité na potvrdenie prítomnosti B. burgdorferi DNA pomocou nested pyrG-špecifickej PCR reakcie, ako už bolo opísané [ 33 ]. Kvôli malej veľkosti vzoriek tkaniva sa tkanivá z desiatich rôznych prípadov B. burgdorferi -pozitívneho invazívneho duktálneho karcinómu spojili na extrakciu DNA. Amplifikovaný produkt PCR sa potom vyhodnotil pomocou gélovej elektroforézy a priameho sekvenovania. Obrázok 5 ukazuje, že pozitívny amplikón s dĺžkou 603 bp bol získaný z extrahovaných vzoriek DNA rakoviny prsníka, ako aj z pozitívnej kontroly DNA B. burgdorferi , ale nie z negatívnych kontrolných vzoriek „Žiadna DNA“. PCR amplifikované produkty sa ďalej potvrdili na prítomnosť Borrelia spp. priamou sekvenčnou analýzou a mapované pomocou nástroja Basic Local Alignment Search Tool (BLAST, Obr. 6 ). Maximálne pozorované výsledky boli špecifické kmene B. burgdorferi ss (identita: 99 %).

Cieľom tejto štúdie bolo tiež zistiť, či progresia a metastázy rakoviny prsníka korelujú s prítomnosťou B. burgdorferi pomocou dostupných klinických údajov o pacientoch z komerčných tkanivových polí. Stupeň rakoviny prsníka a vek pacienta v čase získania bioptických tkanív sa považovali za primárne kritériá pre kvantitatívnu analýzu tkanív pozitívnych na B. burgdorferi z celkového počtu tkanív pre každé kritérium.

Údaje stupňa rakoviny pre vzorky tkaniva pacienta sú kategorizované nasledovne: Stupeň I, podobajúci sa normálnym prsným bunkám a vykazujúci pomalý rast; Stupeň II, vykazujúci charakteristiky menej ako normálne prsné bunky a rast rýchlejšie ako zvyčajne; Stupeň III, pozostávajúci z abnormálnych buniek prsníka a typicky vykazujúci agresívny rast. Analýza zvažovala koreláciu medzi rýchlosťou rastu rakoviny a percentom vzoriek tkaniva pozitívnych na B. burgdorferi , pričom odhalila nasledujúcu distribúciu: stupeň I (37 %), stupeň II (14 %) a stupeň III (28 %) (pozri obr. 7 ).

Na preskúmanie možnej korelácie medzi vekom pacientky a tkanivami rakoviny prsníka pozitívnymi na B. burgdorferi boli pacientky rozdelené do troch vekových skupín. Percento vzoriek pozitívnych na B. burgdorferi v každej vekovej skupine bolo nasledovné: 20–40 rokov (15 %), 41–60 rokov (19 %) a 61–70+ rokov (30 %) (pozri obr. 8 ).

Diskusia

Táto štúdia skúmala prítomnosť B. burgdorferi v rôznych typoch tkanív rakoviny prsníka, vrátane invazívneho lobulárneho, duktálneho a intraduktálneho karcinómu. Imunohistochemické farbenie sa uskutočnilo na vzorkách ľudského prsného tkaniva schválených FDA na detekciu antigénov B. burgdorferi ss. Výsledky odhalili spirochéty/agregáty B. burgdorferi v približne 20 % vzoriek invazívneho lobulárneho a duktálneho karcinómu, po ktorých nasledovalo 14 % vo vzorkách intraduktálneho karcinómu. Prítomnosť B. burgdorferi vo vzorkách tkaniva identifikovaných imunohistochémiou bola ďalej potvrdená použitím vnorenej PCR a priamej sekvenčnej analýzy na detekciu DNA borélií. Mikroskopická analýza B. burgdorferi -pozitívnych tkanív odhalila jednotlivé spirochéty a agregáty distribuované hlboko v tkanivách rakoviny prsníka. Negatívne kontrolné vzorky normálnych tkanív prsníka nepreukázali žiadne dôkazy ani o antigénoch B. burgdorferi , ani o DNA. Farbenie zápalových markerov uskutočnené na týchto tkanivách rakoviny prsníka odhalilo výraznú zápalovú reakciu hostiteľa, pričom významné zafarbenie bolo pozorované pre markery CXCL8 aj CXCL10 v 25 % vzoriek tkaniva rakoviny prsníka s pozitívnym B. burgdorferi .

Kvantitatívna analýza klinických údajov jednotlivých pacientov pre stupeň rakoviny odhalila, že stupne I a III sú najčastejšie pozorované stupne spojené s detekciou B. burgdorferi -pozitívnych tkanív. Okrem toho analýza založená na kritériách veku pacienta ukázala, že u starších pacientov (60+ rokov) bola väčšia pravdepodobnosť, že budú mať vyšší výskyt B. burgdorferi -pozitívneho tkaniva rakoviny prsníka.

V poslednej dobe sa množia špekulácie o vplyve bakteriálnej mikrobioty na vznik rakoviny a jej progresiu. Napríklad ďalšia špirálovitá baktéria, H. pylori, je rozpoznaná ako pôvodca rakoviny žalúdka a MALT lymfómu [ 4 ]. Štúdie identifikovali dva potenciálne mechanizmy, ktorými H. pylori prispieva k rozvoju rakoviny [ 25 ]. Po prvé, infekcia H. pylori vyvoláva chronický zápal žalúdočnej sliznice, čo vedie k stavom, ako je atrofia a intestinálna metaplázia. Po druhé, bolo preukázané, že H. pylori môže produkovať, uvoľňovať a modifikovať faktory bakteriálnej virulencie v tkanivovom mikroprostredí, čím podporuje progresiu rakoviny [ 25 ]. Ďalším bakteriálnym rodom podieľajúcim sa na rôznych druhoch rakoviny, vrátane rakoviny krčka maternice, vaječníkov a pľúc, sú Chlamydia [ 26–28 ]. Je zaujímavé, že predchádzajúce štúdie dokumentovali koinfekciu B. burgdorferi s H. pylori a Chlamydia spp. u pacientov s lymskou boreliózou [ 29 , 30 ].

Infekčné choroby sa už dlho podieľajú na chronickom zápale spojenom s infekciou [ 31 ]. Chronický zápal je úzko spojený s iniciáciou rakoviny [ 32 , 33 ], pričom štúdie naznačujú, že chemokíny spolu s cytokínmi môžu pôsobiť ako skoré zápalové mediátory, ktoré ovplyvňujú odpoveď hostiteľa na expozíciu patogénu [ 34 ]. Je známe, že chemokíny patriace do rodiny CXC zohrávajú úlohu pri získavaní leukocytov a regulujú mikroprostredie nádoru kontrolou proliferácie nádorových buniek, metastáz, invázie, angiogenézy a terapeutickej rezistencie [ 23 ]. Početné štúdie o Chlamydia trachomatis preukázali jej schopnosť upregulovať hladiny chemokínu CXC v mieste infekcie, a tým vyvolať intenzívnu zápalovú odpoveď [ 35 , 36 ].

B. burgdorferi sa už dlho spája s chronickým zápalom v rôznych orgánoch. Klasickým príkladom je stav kože charakterizovaný hustou lymfocytovou infiltráciou známy ako acrodermatitis chronica atrophicans (ACA) [ 37 ]. Štúdia navyše preukázala adaptívnu a rezistentnú povahu B. burgdorferi , kde pretrvávajúce a vysiľujúce symptómy pretrvávali u pacienta s lymskou boreliózou napriek dlhoročnej liečbe antibiotikami [ 38 ]. Táto štúdia odhalila prítomnosť B. burgdorferi vo viacerých orgánoch, sprevádzanú infiltrujúcou CD3+ T-lymfocytárnou odpoveďou. Početné ďalšie správy naznačujú, že B. burgdorferi môže upregulovať zápalové mediátory, ako sú interleukíny a chemokíny CXCL v hostiteľských bunkách [ 39–41 ].

Zápalové markery v rámci rodiny CXCL boli skúmané vo vzťahu k neurozápalu sprostredkovanému chemo/cytokínmi v cerebrospinálnej tekutine pacientov infikovaných boréliou [ 40 ]. Štúdia dospela k záveru, že abnormálne indexy sérových protilátok a zvýšené hladiny CXCL8 a CXCL10 naznačujú potenciálne spojenie so zápalom sprostredkovaným boréliami [ 40 ]. Podobná upregulácia bola pozorovaná v ľudských mozgových mikrovaskulárnych endotelových bunkách (hBMEC) infikovaných Borrelia bavariensis , kde CXCL8 a CXCL10 boli významne zvýšené, čo korelovalo s bunkovým stresom a vrodenou imunitnou odpoveďou [ 41 ].

Analýza génovej ontológie týchto markerov odhalila signálne kaskády spojené s bunkovou komunikáciou, organizáciou extracelulárnej matrice, bunkovými odpoveďami spúšťanými receptormi rozpoznávania vzorov a spracovaním antigénu. Tieto dráhy naznačujú potenciálne mechanizmy využívané B. burgdorferi na prekročenie hematoencefalickej bariéry (BBB) [ 41 ].

Nedávna transkriptomická analýza bunkovej línie rakoviny prsníka infikovanej B. burgdorferi (MDA-MB-231) a normálnej bunkovej línie prsného epitelu (MCF10A) odhalila spektrum odlišne exprimovaných génov modulovaných intracelulárnou inváziou B. burgdorferi [ 22 ] . Ontologická analýza týchto génov preukázala viaceré markery spojené s infekciou, zápalom a rozvojom rakoviny [ 22 ]. Táto štúdia poukázala na významný trend s upreguláciou chemokínov, vrátane členov rodiny chemokínov s motívom CXC (ako sú CXCL8 a CXCL10), v oboch bunkových líniách po infekcii B. burgdorferi .

Chemokíny CXCL8 a CXCL10 sa podieľajú na stimulácii nádorovej angiogenézy a podpore migrácie a invázie buniek nádoru prsníka a vaječníkov [ 42–46 ]. Naša štúdia odhalila lokalizované zápalové reakcie CXCL8 a CXCL10 v blízkosti spirochét a agregátov B. burgdorferi , čo predstavuje 25 % tkanív pozitívnych na B. burgdorferi pre oba markery (32 % pre samotný CXCL8). Je zaujímavé, že toto pozorovanie sa zistilo prevažne pri duktálnych karcinómoch. Tieto zistenia vyvolávajú otázku, či by mohli byť zahrnuté aj iné zápalové markery, ako sú ďalšie členy rodiny CXCL alebo IL-6, u ktorých sa preukázalo, že sa zvyšujú po infekcii trojnásobne negatívnych buniek rakoviny prsníka B. burgdorferi [ 22 ]. Okrem toho by bolo tiež zaujímavé určiť, aký je rozhodujúci mechanizmus, ktorý stimuluje určité zápalové dráhy pri karcinómoch prsníka.

V následnej štúdii sa zameriavame na skúmanie súvislosti infekcie B. burgdorferi s inými zápalovými markermi, vrátane iných členov rodiny CXCL, IL-6, C-reaktívneho proteínu a tumor nekrotizujúceho faktora-α, z ktorých všetky boli hlásené ako vysoko zvýšené pri rakovine prsníka. Okrem toho budeme skúmať potenciálnu koinfekciu tkanív rakoviny prsníka pozitívnych na B. burgdorferi s H. pylori a Chlamydia spp., keďže koexistencia bola preukázaná v tkanivách kože infikovaných B. burgdorferi .

Významné obmedzenie tejto štúdie spočíva v obmedzenej dostupnosti klinických údajov o jednotlivých pacientoch, čo bráni našej schopnosti plne pochopiť koreláciu medzi infekciou B. burgdorferi , stupňom rakoviny a vekom pacienta. Napríklad variabilita veľkosti vzoriek v rôznych stupňoch rakoviny podkopáva podporu hypotézy naznačujúcej, že infekcia B. burgdorferi môže prispievať k progresii rakoviny. Podobne korelácii medzi vekovými skupinami pacientov a infekciou B. burgdorferi chýbajú dostatočné údaje na komplexnú analýzu, čo oprávňuje potrebu väčšieho súboru údajov o pacientoch na overenie zistení tejto štúdie. Medzi ďalšie faktory, ktoré by mohli zlepšiť naše chápanie, patrí posúdenie korelácie medzi typmi rakoviny prsníka na základe stavu hormonálnych receptorov a klasifikácie štádia TNM, ktorá bohužiaľ nebola k dispozícii pre väčšinu vzoriek biopsie pacientov, a preto nebola začlenená do našej analýzy. Hoci existujú obmedzenia, tieto mikročipy tkanivovej biopsie sú schválené FDA a komerčne dostupné, vďaka čomu sú spoľahlivé a ľahko reprodukovateľné pre podobné štúdie rakoviny.

Stručne povedané, táto štúdia naznačuje, že patogénne infekcie, ako je B. burgdorferi, môžu zohrávať úlohu pri podpore rakoviny prsníka a/alebo prispievaní k pretrvávajúcej infekcii moduláciou imunitno-zápalovej odpovede v mikroprostredí nádoru. Zistenia ilustrujú schopnosť B. burgdorferi nielen šíriť sa ako spirochéty, ale aj vytvárať agregáty hlboko v tkanivách rakoviny prsníka. Okrem toho sa pozorovalo, že B. burgdorferi indukuje vysoké hladiny lokalizovaných zápalových reakcií v blízkosti infikovanej oblasti prostredníctvom chemokínov CXCL8 a CXCL10. V dôsledku toho je nevyhnutné ďalšie skúmanie zápalových markerov na objasnenie úlohy B. burgdorferi v progresii rakoviny a manipulácii s imunitnou odpoveďou. Tento výskum by mohol ponúknuť príležitosti na vývoj panelu diagnostických markerov na monitorovanie infekcie B. burgdorferi a progresie rakoviny.

Zdroje financovania

Tento výskum nezískal žiadne externé financovanie.

Autorské príspevky

Konceptualizácia, GG, JYS, NJP, ST; metodika, NJP, ST, JYS, GG; validácia, NJP, ST, GG, JYS a JJ; formálna analýza, NJP, ST, GG, JYS; vyšetrovanie, NJP, ST, GG, JYS a JJ; zdroje, ES; spracovanie údajov, NJP, ST, GG a JYS; písanie – príprava pôvodného návrhu, NJP a ES; písanie – kontrola a úprava NJP, ST, JJ, JMP a ES; vizualizácia, NJP, ST, JJ, JMP, ES; dozor, ES; administrácia projektu, ES Všetci autori si prečítali a súhlasili s publikovanou verziou rukopisu.

Konflikt záujmov

Autori vyhlásili, že neexistujú žiadne konkurenčné záujmy.

Vyhlásenie o dostupnosti údajov

Údaje prezentované v tejto štúdii sú dostupné na primeranú žiadosť od príslušného autora.

Poďakovanie

Táto práca bola podporená nadáciou Pink Clover Foundation a National Philanthropic Trust. Podporovateľ nemal žiadnu úlohu pri navrhovaní štúdie, zbere údajov a analýze, rozhodovaní o publikovaní alebo príprave rukopisu. Autori by tiež radi poďakovali Dr. Joergovi Nikolausovi z Yale West Campus Imaging Core za poskytnutie školenia a usmernenia pre toto zariadenie.

Referencie

1. ↑
Americká rakovinová spoločnosť . Fakty a čísla o rakovine .https://www.cancer.org/research/cancer-facts-statistics/all-cancer-facts-figures/cancer-facts-figures-2021.html. Sprístupnené 11. februára 2024 .
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
2. ↑
Dalton- Griffin L , Kellam P. Infekčné príčiny rakoviny a ich detekcia.J Biol.2009;8(7):67.https://doi.org/10.1186/jbiol168.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
3. ↑
Pucułek M , Machlowska J , Wierzbicki R , Baj J , Maciejewski R , Sitarz R. Faktory súvisiace s Helicobacter pylori vo vývoji rakoviny žalúdka so zvláštnym zreteľom na podtyp so skorým nástupom.Oncotarget.2018;9(57):31146–31162.https://doi.org/10.18632/oncotarget.25757.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
4. ↑
Elsalem L , Jum’ah AA , Alfaqih MA , Aloudat O. Bakteriálna mikrobiota gastrointestinálnych rakovín: úloha v patogenéze rakoviny a terapeutické perspektívy.Clin Exp Gastroenterol.2020;13:151–185.https://doi.org/10.2147/CEG.S243337.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
5. ↑
Cummins J , Tangney M. Baktérie a nádory: pôvodcovia alebo oportúnni obyvatelia?Infikovať rakovinu agenta.2013;8(1):11.https://doi.org/10.1186/1750-9378-8-11.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
6. ↑
Yusuf K , Sampath V , Umar S. Bakteriálne infekcie a rakovina: skúmanie tejto asociácie a jej dôsledkov pre pacientov s rakovinouInt J Mol Sci.2023;24(4):3110-3110.https://doi.org/10.3390/ijms24043110.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
7. ↑
Urbaniak C , Gloor GB , Brackstone M , Scott L , Tangney M , Reid G .Mikrobiota prsného tkaniva a jej spojenie s rakovinou prsníka.Appl Environ Microbiol.2016;6(3):146-153.https://doi.org/10.1556/1886.2016.00012.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
8. ↑
Banerjee S , Tian T , Wei Z , Shih N , Feldman MD , Peck KN a kol.Výrazné mikrobiálne podpisy spojené s rôznymi typmi rakoviny prsníka.Predná strana Microbiol.2018;9:951.https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.00951.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
9. ↑
Garbe C , Stein H , Dienemann D , Orfanos CE .Kožný B bunkový lymfóm spojený s Borrelia burgdorferi: klinická a imunohistologická charakterizácia štyroch prípadov.J Am Acad Dermatol.1991;24(4):584–590.https://doi.org/10.1016/0190-9622(91)70088-j.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
10.
Jelić S , Filipović-Ljesković I .Pozitívna sérológia borélií Lymskej choroby pri primárnom kožnom B-bunkovom lymfóme: štúdia u 22 pacientov; je to náhodný nález?Hematol Oncol.1999;17(3):107-116.https://doi.org/10.1002/(sici)1099-1069(199909)17:3<107::aid-hon644>3.0.co;2-r.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
11.
Schöllkopf C , Melbye M , Munksgaard L , Smedby KE , Rostgaard K , Glimelius B ,a kol.Boréliová infekcia a riziko non-Hodgkinovho lymfómu.Krv.2008;111(12):5524–5529.https://doi.org/10.1182/blood-2007-08-109611.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
12. ↑
Ribet D , Cossart P .Ako bakteriálne patogény kolonizujú svojich hostiteľov a napádajú hlbšie tkanivá.Mikróby infikujú.2015;5(3):173-183.https://doi.org/10.1016/j.micinf.2015.01.004.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
13. ↑
Hyde JA .Borrelia burgdorferi sa neustále pohybuje a pokračuje: prehľad šírenia a invázie borelií.Front Immunol.2017;8:114.https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00114.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
14. ↑
Ma Y , Sturrock A , Weiss JJ .Intracelulárna lokalizácia Borrelia burgdorferi v ľudských endotelových bunkách.Infect Immun.1991;59:671–678.https://doi.org/10.1128/iai.59.2.671-678.1991.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
15.
Georgilis K , Peacocke M , Klempner MS .Fibroblasty chránia spirochétu lymskej choroby, Borrelia burgdorferi, pred ceftriaxónom in vitro.J Infect Dis.1992;166:440–444.https://doi.org/10.1093/infdis/166.2.440.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
16.
Klempner MS , Noring R , Rogers RA .Invázia fibroblastov ľudskej kože spirochétou lymskej choroby, Borrelia burgdorferi.J Infect Dis.1993;167:1076–1081.https://doi.org/10.1093/infdis/167.5.1074.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
17.
Montgomery RR , Malawista SE .Vstup Borrelia burgdorferi do makrofágov je koncový a vedie k degradácii v lyzozómoch.Infect Immun.1996;64:2867–2872.https://doi.org/10.1128/iai.64.7.2867-2872.1996.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
18.
Livengood JA , Gilmore Jr RD .Invázia ľudských neurónových a gliových buniek infekčným kmeňom Borrelia burgdorferi.Mikróby infikujú.2006;8:2832–2840.https://doi.org/10.1016/j.micinf.2006.08.014.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
19. ↑
Gaur G , Sawant JY , Chavan AS , Khatri VA , Liu Y-H , Zhang M ,a kol.Účinok invázie Borrelia burgdorferi v normálnych a neoplastických prsných epiteliálnych bunkách.Antibiotiká.2021;10(11):1295.https://doi.org/10.3390/antibiotics10111295.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
20. ↑
Tracy KE , Baumgarth N .Borrelia burgdorferi manipuluje s vrodenou a adaptívnou imunitou, aby vytvorila perzistenciu v hostiteľských rezervoároch hlodavcov.Front Immunol.2017;8:116.https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00116.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
21. ↑
Debbarma A , Mansolf M , Khatri VA , Valentino JA , Sapi E. Účinok Borrelia burgdorferi na expresiu miRNA v rakovine prsníka a normálnych epiteliálnych bunkách prsníka.Mikroorganizmy.2023;11(6):1475.https://doi.org/10.3390/microorganisms11061475.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
22. ↑
Khatri VA , Paul S , Patel NJ , Thippani S , Sawant JY , Durkee KL a kol.Globálna transkriptomická analýza rakoviny prsníka a normálnych epiteliálnych buniek prsníka infikovaných Borrelia burgdorferi.Eur J Microbiol Immunol.2023;13(3):63-76.https://doi.org/10.1556/1886.2023.00031.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
23. ↑
Zhou C , Gao Y , Ding P , Wu T , Yi G. Úloha členov rodiny CXCL pri rôznych chorobách.Cell Death Discov.2023;9:212.https://doi.org/10.1038/s41420-023-01524-9.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
24. ↑
Sapi E , Pabbati N , Datar A , Davies EM , Rattelle A , Kuo BA .Zlepšené kultivačné podmienky pre rast a detekciu borélií z ľudského séra.Int J Med Sci.2013;10(4):362-376.https://doi.org/10.7150/ijms.5698.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
25. ↑
Vogiatzi P , Cassone M , Luzzi I , Lucchetti C , Otvos L Jr , Giordano A. Helicobacter pylori ako karcinogén I. triedy: fyziopatológia a stratégie manažmentu.J Cell Biochem.2007;102(2):264-273.https://doi.org/10.1002/jcb.21375.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
26. ↑
Yang X , Siddique A , Khan AA , Wang Q , Malik A , Jan AT ,a kol.Infekcia Chlamydia trachomatis: ich potenciálna implikácia v etiológii rakoviny krčka maternice.J Rakovina.2021;12:4891–4900.https://doi.org/10.7150/jca.58582.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
27.
Arcia Franchini AP , Iskander B , Anwer F , Oliveri F , Fotios K , Panday P a kol.Úloha Chlamydia trachomatis v patogenéze rakoviny krčka maternice.Cureus.2022;14(1):e21331.https://doi.org/10.7759/cureus.21331.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
28.
Wittman AJ , Jackson LA , Vaughan TL .Chlamydia pneumoniae a rakovina pľúc: epidemiologické dôkazy.Biomarkery epidemiolu rakoviny Predch.2005 apríl;14(4):773-8.https://doi.org/10.1158/1055-9965.EPI-04-0599.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
29. ↑
Middelveen MJ , Filush KR , Bandoski C , Kasliwala RS , Melillo A , Stricker RB akol.Zmiešané biofilmy Borrelia burgdorferi a Helicobacter pylori v dermatologických vzorkách Morgellonovej choroby.Zdravotníctvo (Bazilej).2019;7(2):70.https://doi.org/10.3390/healthcare7020070.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
30. ↑
Sapi E , Gupta K , Wawrzeniak K , Gaur G , Torres J , Filush K ,a kol.Borélie a chlamýdie môžu vytvárať zmiešané biofilmy v infikovaných tkanivách ľudskej kože.Eur J Microbiol Immunol.2019;9(2):46-55.https://doi.org/10.1556/1886.2019.00003.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
31. ↑
Furman D , Campisi J , Verdin E , Carrera-Bastos P , Targ S , Franceschi C ,a kol.Chronický zápal v etiológii ochorenia počas celého života.Nat Med.2019;25(12):1822–1832.https://doi.org/10.1038/s41591-019-0675-0.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
32. ↑
Coussens LM , Werb Z .Zápal a rakovina.Príroda.2002;420(6917):860–867.https://doi.org/10.1038/nature01322.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
33. ↑
Zhao H , Wu L , Yan G , Chen Y , Zhou M , Wu Y a kol.Zápal a progresia nádoru: signálne dráhy a cielená intervencia.Sig Transduct Target Ther2021;6:263.https://doi.org/10.1038/s41392-021-00658-5.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
34. ↑
Chen L , Deng H , Cui H , Feng J , Zuo Z , Deng J akol.Zápalové reakcie a ochorenia orgánov spojené so zápalom.Oncotarget2017;9(6):7204–7218.https://doi.org/10.18632/oncotarget.23208.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
35. ↑
Wan C , Latter JL , Amirshahi A , Symonds I , Finnie J , Bowden N ,a kol.Progesterón aktivuje viaceré vrodené imunitné dráhy v endocervikálnych bunkách infikovaných Chlamydia trachomatis.Am J Reprod Immunol.2013;71(2):165-177.https://doi.org/10.1111/aji.12168.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
36. ↑
Cheong HC , Cheok YY , Chan YT , Tang TF , Sulaiman S , Looi CY a kol.Proteín Pgp3 kódujúci plazmid Chlamydia trachomatis indukuje sekréciu odlišných zápalových podpisov z cervikálnych epiteliálnych buniek HeLa.BMC Microbiol.2023;23(1):58.https://doi.org/10.1186/s12866-023-02802-3.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
37. ↑
Asbrink E , Hovmark A , Hederstedt B .Spirochetová etiológia acrodermatitis chronica atrophicans Herxheimer.Acta Derm Venereol.1984;64(6):506–512.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
38. ↑
Sapi E , Kasliwala RS , Ismail H , Torres JP , Oldakowski M , Markland S ,a kol.Dlhodobá perzistenciaBorrelia burgdorferiv tkanivách pacienta s lymskou boreliózou.Antibiotiká.2019;8(4):183.https://doi.org/10.3390/antibiotics8040183.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
39. ↑
Habicht GS , Katona LI , Benach JL .Cytokíny a patogenéza neuroboreliózy: Borrelia burgdorferi indukuje v bunkách gliómu sekréciu interleukínu-6.J Infect Dis.1991;164(3):568–574.https://doi.org/10.1093/infdis/164.3.568.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
40. ↑
Liba Z , Nohejlová H , Čapek V , Kršek P , Šedivá A , Kayserová J .Užitočnosť chemokínov CCL2, CXCL8, 10 a 13 a interleukínu 6 v pediatrickej kohorte na rozpoznanie neurozápalu a v kontexte tradičných neurozápalových biomarkerov mozgovomiechového moku.PLoS One.2019;14(7):e0219987.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219987.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
41. ↑
Tkáčová Z , Bhide K , Mochnáčová E , Petroušková P , Hruškovicová J , Kulkarni A ,et al.Komplexné mapovanie bunkovej odpovede na Borrelia bavariensis v mozgových mikrovaskulárnych endoteliálnych bunkách in vitro pomocou RNA-Seq.Predná strana Microbiol.2021;12.https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.760627.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
42. ↑
Xiong X , Liao X , Qiu S , Xu , H , Zhang S , Wang S ,a kol.CXCL8 v biológii nádorov a jeho dôsledky pre klinickú transláciu.Predné Mol Biosci.2022;9:723846.https://doi.org/10.3389/fmolb.2022.723846.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
43.
Fu X , Wang Q , Du H , Hao H .CXCL8 a peritoneálne metastázy rakoviny vaječníkov a žalúdka.Front Immunol.2023;14:1159061.https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1159061.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
44.
Kim M , Choi HY , Woo JW , Chung YR , Park SY .Úloha CXCL10 v progresii in situ k invazívnemu karcinómu prsníka.Sci Rep.2021;11(1):18007.https://doi.org/10.1038/s41598-021-97390-5.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
45.
Jin J , Li Y , Muluh TA , Zhi L , Zhao Q. Identifikácia charakterizácie mikroprostredia nádoru relevantného pre CXCL10 a klinického výsledku pri rakovine vaječníkov.Predný Genet.2021;12:678747.https://doi.org/10.3389/fgene.2021.678747.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia
46.
K Au K , Peterson N , Truesdell P , Reid-Schachter G , Khalaj K , Ren R ,a kol.CXCL10 mení imunitné mikroprostredie nádoru a progresiu ochorenia v syngénnom myšacom modeli vysokého stupňa seróznej rakoviny vaječníkov.Gynecol Oncol.2017;145(3):436–445.https://doi.org/10.1016/j.ygyno.2017.03.007.
- Vyhľadajte v službe Študovňa Google
- Exportná citácia

Hot News

12 najsilnejších európskych rastlín pre zdravé cievy a dobrý prietok krvi

ByAdmin

-13. marca 2026

Potraviny, ktoré prinášajú pokoj a vyrovnanosť

ByAdmin

-5. marca 2026

About

Radosť zo života rastie s chuťou žiť. Tieto stránky sú venované popísanej praxi skutočných odborníkov z celého sveta.

Príroda Životu,
Človek Prírode

Want to Partnership with me? Book A Call

Popular Posts

Vŕba by nemala chýba zozname prirodzených „riedidiel“ krvi

Prirodzené „riedidlá“ krvi

12 najsilnejších európskych rastlín pre zdravé cievy a dobrý prietok krvi

Categories

Abstrakt

Úvod