Biotín má dôležitú funkciu v metabolizme cukrov, tukov a aminokyselín. Pôsobí ako kofaktor v reakciách cyklu kyseliny citrónovej. Je teda dôležitý ako pre vznik energie, tak aj pre transformácie metabolitov. Je nevyhnutný na prenos oxidu uhličitého a na udržanie stálej hladiny krvného cukru. Biotinylačné reakcie, pri ktorých sa biotín viaže na rôzne aminokyseliny, sú dôležité pre rast a obnovu buniek a tkanív. Silná afinita biotínu k aminokyselinám je aj príčinou symptómu „vaječného bielka“. Podľa najnovších výskumov zohráva biotín významnú úlohu aj pri expresii génov na transkripčnej a translačnej úrovni a podieľa sa aj na replikácii DNA.
Suplementácia môže liečiť príznaky ako vypadávanie vlasov a slabý rast nechtov u ľudí s nízkou hladinou biotínu. Recenzia uverejnená v prehľade z roku 2017 zistila, že biotínové doplnky zlepšili rast vlasov a nechtov u ľudí so získanými a zdedenými stavmi, ktoré spôsobujú nedostatok biotínu.
