Príroda Životu,
Človek Prírode

Want to Partnership with me? Book A Call

Margot Robbie a ‚Barbie‘ herci pili čaj z ostropestreca mariánskeho pre rozžiarenú pleť. Funguje to?

Ako zbierať píniové oriešky

4 pôsobivé zdravotné benefity píniových orieškov

Holotranskobalamín, marker stavu vitamínu B-12: analytické aspekty a klinická užitočnosť 1, 2, 3, 4, 5

27 min read

júl 2011; 94(1): 359S–365S.

doi: 10.3945 / ajcn.111.013458

PMCID: PMC3127504

PMID: 21593496

Pôvodný článok:

Holotranskobalamín, marker stavu vitamínu B-12: analytické aspekty a klinická užitočnosť ^1,^2,^3,^4,⁵

Ebba Nexo a Elke Hoffmann-Lücke

Preklad: Dr.FYTO Team

Abstrakt

Približne jedna štvrtina cirkulujúceho kobalamínu (vitamín B-12) sa viaže na transkobalamín (holoTC) a je tak dostupná pre bunky tela. Z tohto dôvodu sa holoTC označuje aj ako aktívny vitamín B-12. HoloTC bol navrhnutý ako optimálny marker skorého nedostatku vitamínu B-12 pred > 20 rokmi. Tento návrh viedol k vývoju vhodných testov na meranie zlúčeniny a klinickým štúdiám, ktorých cieľom bolo ukázať výhodu merania holoTC skôr ako vitamínu B-12. Dnes je možné holoTC analyzovať 3 metódami:

priamym meraním komplexu medzi transkobalamínom a vitamínom B-12,
meraním vitamínu B-12 naviazaného na transkobalamín
alebo meraním množstva transkobalamínu nasýteného vitamínom B-12.

Tieto tri metódy poskytujú podobné výsledky, ale priame meranie holoTC komplexu je v klinickom prostredí z praktického hľadiska vhodnejšie. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12.

ÚVOD

Prečo sa meria kobalamín (vitamín B-12) a nie podiel vitamínu, ktorý môže vstúpiť do buniek, holotranskobalamín (holoTC)?

V osemdesiatych rokoch minulého storočia si túto otázku často kládol zosnulý Victor Herbert ( 1 ). V tom čase bolo možné holoTC merať iba výpočtom rozdielu medzi vitamínom B-12 (napr. 500 pmol/l) a frakciou vitamínu B-12, ktorá nebola naviazaná na transkobalamín (napr. 420 pmol/l). V dôsledku toho bola neistota hodnôt holoTC príliš veľká na to, aby umožnila správne vyhodnotenie klinickej užitočnosti holoTC v porovnaní s inými markermi stavu vitamínu B-12 [plazmatický kobalamín (vitamín B-12), homocysteín (tHcy) a kyselina metylmalónová ( MMA)]. Dnes je dostupných niekoľko vhodných metód na meranie holoTC a údaje o jeho analytických a klinických aspektoch sa rýchlo hromadia.

Tento prehľad sumarizuje súčasné poznatky o analytických aspektoch, determinantoch plazmatického holoTC a zaoberá sa aj klinickým účinkom holoTC v porovnaní s celkovým vitamínom B-12. Dospeli sme k záveru, že meranie holoTC bude pravdepodobne cenné aj pre celopopulačný skríning stavu vitamínu B-12.

HoloTC A INÉ MARKERY STAVU VITAMÍNU B-12

Vitamín B-12 v plazme sa viaže na 2 proteíny, transkobalamín a haptokorín (Obr. 1). Transkobalamín nesie menšiu časť cirkulujúceho vitamínu B-12 a iba ≈10 % bielkovín je nasýtených vitamínom B-12 ( 2 ). Transkobalamín transportuje vitamín B-12 do všetkých buniek tela a je zodpovedný za transport ≈4 nmol vitamínu B-12 každý deň ( 3 ).

Obr. 1.

Kobalamín [vitamín B-12 (B12)] a jeho väzbové proteíny v ľudskej plazme. Obrázok ukazuje vzťah medzi celkovou koncentráciou proteínov viažucich vitamín B-12 v plazme a distribúciou vitamínu B-12 a jeho analógov na proteínoch. Použité priemerné koncentrácie sú nasledovné – celkový transkobalamín: 1000 pmol/l [holotranskobalamín (HoloTC): 100 pmol/l; apotranskobalamín (ApoTC): 900 pmol/l]; celkový haptokorín: 450 pmol/l [vitamín B-12 viazaný na haptokorín (B12HC): 200 pmol/l; analógy vitamínu B-12 viazané na haptokorín (AnaHC): 200 pmol/l; apohaptokorín (ApoHC): 50 pmol/l]; celkový vitamín B-12: 300 pmol/l.

Haptocorrin je takmer úplne nasýtený glykoproteín viažuci vitamín B-12 neznámej funkcie, ktorý nesie hlavnú časť cirkulujúceho vitamínu B-12 a okrem toho aj neaktívne formy vitamínu, takzvané analógy. Metabolizmus proteínu je pomalý, s obratom ≈0,1 nmol vitamínu B-12 každý deň ( 4 – 6 ).

My a iní sme zaviedli metódy na výskumné účely, ktoré sú vhodné na meranie transkobalamínu a haptokorínu, či už nasýtených alebo nie ( 7 – 9 ). Klinickí lekári sa však zaujímali najmä o merania celkového vitamínu B-12 ( 10 ) a holoTC.

Skutočnosť, že pre bunky je dostupný iba vitamín B-12, ktorý sa viaže na transkobalamín, podporila myšlienku, že meranie holoTC by bolo klinicky zmysluplnejšie ako meranie celkového vitamínu B-12 (všetok vitamín B-12, ktorý sa viaže na transkobalamín a haptokorín). Pred niekoľkými rokmi Victor Herbert navrhol určiť stav vitamínu B-12 pomocou holoTC ako prvého markera, ktorý sa zníži ( 11 ). Niekoľko štúdií o vegetariánskych populáciách potvrdilo tento koncept ( 12 , 13 ).

Zatiaľ čo plazmatické koncentrácie vitamínu B-12 a holoTC možno použiť ako mieru množstva vitamínu B-12 dostupného pre bunky tela, metabolity tHcy a MMA odrážajú akýkoľvek nedostatok vitamínu B-12 v bunkách. Plazmatické tHcy aj MMA sa akumulujú u pacientov s nedostatkom vitamínu B-12 (Obrázok 2). Vo všeobecnosti má tHcy nízku špecificitu, pretože sa zvyšuje aj u pacientov s nedostatkom folátu a možno aj tiamínu a vitamínu B-6 ( 14 ). V populácii obohatenej folátmi je však špecificita tHcy ako markera nedostatku vitamínu B-12 podstatne lepšia ( 15 ). MMA je citlivý marker nedostatku vitamínu B-12 a zvýšená koncentrácia MMA sa často používa ako zlatý štandard na klasifikáciu stavu pacienta ako deficitného alebo nedeficitného vitamínu B-12. Hlavnými nevýhodami sú nízka špecifickosť hranične zvýšených hodnôt MMA a obmedzená dostupnosť testu ( 16 ).

OBRÁZOK 2

Stav markerov kobalamínu [vitamín B-12 (B12)]. Obrázok ukazuje vzťah medzi markermi nedostatku vitamínu B-12. Holotranskobalamín (holoTC) transportuje vitamín B-12 do buniek väzbou na špecifický receptor CD320. V bunke pôsobí vitamín B-12 ako koenzým pre 2 enzýmy. Metionínsyntetáza (5-metyltetrahydropteroyl- l – glutamát: l -homocysteín- S-metyltransferáza; EC 2.1.1.13), prítomný v cytoplazme, premieňa homocysteín (tHcy) na metionín. Metylmalonyl-koenzým A (-CoA) mutázy (metylmalonyl-CoA CoA-karbonylmutáza; EC 5.4.99.2), ktoré sú prítomné v mitochondriách, sa podieľajú na premene metylmalonyl-CoA na sukcinyl-CoA. Zníženie holoTC má za následok zníženie bunkovej absorpcie vitamínu B-12. Akonáhle dôjde k nedostatku buniek, kyselina metylmalónová (MMA) a tHcy sa hromadia v krvnom obehu; celková koncentrácia vitamínu B-12 klesá.

U inak zdravých jedincov majú všetky 4 testy (vitamín B-12, holoTC, tHcy a MMA) silný vzťah k príjmu vitamínu B-12, pričom koncentrácie v rovnovážnom stave sú pri dennom príjme 4–7 μg vitamínu B-12 ( 17 ). Nepriamo takéto štúdie naznačujú, že všetky 4 markery môžu byť užitočné na sledovanie stavu vitamínu B-12 v populácii v priebehu času.

MERANIE HoloTC

K dispozícii sú tri rôzne typy metód merania holoTC a ako je opísané nižšie, ukázali sme, že tieto metódy poskytujú primerane podobné hodnoty. Prvý publikovaný prístup kombinoval iónovú precipitáciu transkobalamínu s meraním množstva vitamínu B-12 zachyteného v precipitáte ( 18 – 20 ). Lindemans et al ( 21 ) zlepšili tento prístup s použitím protilátok namierených proti transkobalamínu namiesto iónovej separácie a Ulleland et al ( 22 ) vyvinuli verziu tohto prístupu, ktorá zahŕňala meranie zachyteného vitamínu B-12 izotopovým riediacim testom, holoTC-rádioimunotest (RIA). V inej verzii Refsum a kol. ( 9) meral vitamín B-12 pomocou mikrobiologickej metódy. Ďalším prístupom je odstránenie apo-transkobalamínu guľôčkami potiahnutými vitamínom B-12 s následným meraním holoTC, ktorý zostáva v supernatante ( 23 ).

Multicentrická štúdia, do ktorej boli zapojené 4 európske laboratóriá, hodnotila holoTC-RIA (kalibračná krivka: 10–160 pmol/L) a imunosorbentový test s enzýmom viazaným na holoTC (kalibračná krivka: 1,6–100 pmol/l) ( 24 ). Výsledky štúdie ukázali podobné hodnoty naprieč laboratóriami a testovanými metódami. Dlhodobá nepresnosť bola 6 % pre enzýmový imunosorbentový test a > 10 % pre RIA ( 24 ). Výsledky RIA testu boli tiež podobné výsledkom, ktoré Refsum et al ( 9 ) získali s použitím mikrobiologického testu (kalibračná krivka: 1,36–24,5 pmol/l; nepresnosť: 4–7 %).

Dnes bol holoTC-RIA nahradený testom, ktorý využíva holoTC-špecifické monoklonálne protilátky ( 25 ). Na platforme AxSYM (Abbott Labs, North Chicago, IL) má metóda rozsah merania 3–100 pmol/l a celkovú nepresnosť 6–9 %. Výsledky získané touto metódou sa dobre porovnávajú s výsledkami holoTC-RIA ( 26 , 27 ).

DETERMINANTY HoloTC

Keď sa marker používa na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populácii, treba pamätať na to, že zvýšenie koncentrácie holoTC alebo vitamínu B-12 alebo zníženie koncentrácie MMA alebo tHcy inými determinantmi ako je nedostatok vitamínu B-12 predpovedá falošnú dostatočný stav. Je zrejmé, že opak je pravdou pre predikciu falošného nedostatočného stavu.

My a iní sme zdokumentovali determinanty holoTC, ktoré nesúvisia so stavom vitamínu B-12. Výsledky sú zhrnuté nižšie a do určitej miery vo vzťahu k determinantom pre ďalšie markery stavu vitamínu B-12.

Odber a skladovanie krvi

HoloTC, podobne ako vitamín B-12, je stabilný analyt a na odber vzoriek krvi na meranie holoTC nie sú potrebné žiadne špeciálne opatrenia. HoloTC je stabilný aj pri skladovaní pri -20 °C až -70 °C, pravdepodobne roky. Loikas et al ( 28 ) systematicky skúmali stabilitu pri skladovaní pri –70 °C po dobu až 16 mesiacov.

Denná variácia

Hlavným problémom je možné zvýšenie holoTC po príjme potravy bohatej na vitamín B-12. Niekoľko štúdií, ktoré sa zaoberali týmto problémom, ukázalo veľmi obmedzené variácie súvisiace s príjmom normálnej stravy ( 9 , 29 ), a preto je možné odoberať krv ľuďom nalačno aj nepôstnym. Avšak opakovaný príjem vysokých fyziologických dávok vitamínu B-12 (napr. 9 μg 3-krát za 1 deň) zvyšuje koncentráciu holoTC (a v menšej miere aj celkovú koncentráciu vitamínu B-12) do 24 hodín ( 30 ). Toto zistenie sme použili na vývoj klinického testu absorpcie vitamínu B-12, ako je opísané nižšie.

Plazma v porovnaní so sérom

EDTA plazma vykazovala v niektorých štúdiách mierne vyššie hodnoty holoTC alebo celkového transkobalamínu ( 22 , 31 ), v iných nie ( 9 ). Vo všeobecnosti je prijateľné použiť na analýzu koncentrácií holoTC plazmu aj sérum.

Pohlavie, rasa a životný cyklus

HoloTC, podobne ako celkový vitamín B-12, sa v obmedzenom rozsahu líši podľa pohlavia alebo veku. Všimnite si však, že Refsum et al ( 9 ) uvádzajú o niečo nižšie koncentrácie u mladších žien. Na rozdiel od toho sme my a iní pozorovali výrazné zmeny v metabolických markeroch, najmä tHcy, vo vzťahu k veku a pohlaviu ( 32 , 14 ).

Pretože haptokorín klesá, celkový obsah vitamínu B-12 sa tiež znižuje u tehotných žien na ≈ 50 % v termíne v porovnaní s 2 mesiacmi po pôrode. Naproti tomu koncentrácie holoTC zostávajú počas tehotenstva nezmenené ( 33 , 34 ). Z tohto dôvodu je holoTC lepší ako vitamín B-12 na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populačných štúdiách, ktoré zahŕňajú tehotné ženy. Informácie o rasových rozdieloch v koncentráciách holoTC a iných ukazovateľoch stavu vitamínu B-12 sú obmedzené.

Celkový transkobalamín a holoTC

HoloTC predstavuje 5–20 % celkového transkobalamínu ( 23 ). Celkový transkobalamín sa u pacientov s deficitom vitamínu B-12 nemení (E Nexo, nepublikované údaje, 2011). Z tohto dôvodu sme nezískali žiadne ďalšie informácie z merania saturácie transkobalamínu na rozdiel od samotného merania holoTC ( 32 ). Pozorovali sme však pokles celkového transkobalamínu po tom, čo zdravým jedincom bola podávaná denná dávka vitamínu B-12 500 μg. Koncentrácia sa zvýšila smerom k hodnotám predbežného zaťaženia v priebehu nasledujúcich 84 dní ( 35 ). Toto pozorovanie môže súvisieť so skutočnosťou, že bunkový receptor pre transkobalamín, CD320, rozpoznáva skôr holoTC ako apotranskobalamín ( 36 – 38). Po dodaní vitamínu B-12 bunky absorbujú zvýšené množstvo holoTC. Keď sú však bunky nasýtené vitamínom B-12, celkový transkobalamín dosiahne novú rovnováhu.

Transkobalamínové genotypy

Transkobalamín sa vyskytuje v mnohých genotypoch ( 39 ) a niekoľko autorov jasne zdokumentovalo, že prítomný genotyp, najmä P259R (TCN2 776C→G), ovplyvňuje celkovú koncentráciu proteínu. Celkové koncentrácie transkobalamínu sú o ≈20 % nižšie u jedincov s genotypom 776GG ako u jedincov s genotypom 776CC; jedinci s genotypom 776GC majú stredné hodnoty. Distribúcia genotypov sa medzi štúdiami trochu líši, ale je ≈30 % pre P259P (776CC), 50 % pre P259R (776CG) a 20 % pre R259R (776GG) ( 9 ). Koncentrácie HoloTC sú ovplyvnené v oveľa menšej miere transkobalamínovými genotypmi, hoci tento vplyv bol v niektorých štúdiách významný ( 9 , 40 , 41 ).

Iné choroby

Transkobalamín je relatívne malý proteín s molekulovou hmotnosťou ≈40 kDa ( 42 ) a je filtrovaný v obličkách. V dôsledku toho sa koncentrácie holoTC zvyšujú, keď sa znižuje funkcia obličiek ( 32 , 43 ). To isté platí pre celkový vitamín B-12, aj keď v oveľa menšej miere, pretože zdanlivá molekulová hmotnosť haptokorínu prevyšuje molekulovú hmotnosť albumínu ( 44 ). Niektoré štúdie preukázali len okrajový vzťah medzi funkciou obličiek a koncentráciami holoTC a celkového vitamínu B-12 ( 9 , 45 ). Metabolické markery vykazujú výrazné zvýšenie koncentrácie so zvýšením sérového kreatinínu ( 32 , 45). Výsledkom je, že pri použití metabolických markerov je možné nesprávne zaradiť osobu s poškodenou funkciou obličiek na nedostatok vitamínu B-12 a (menej pravdepodobné), že pri užívaní holoTC nebude mať nedostatok.

Odborníci vyjadrili obavy z množstva ďalších stavov, najmä v súvislosti s holoTC a možno aj celkovým vitamínom B-12. Pôvodne sme považovali transkobalamín za proteín akútnej fázy zvýšený pri stavoch, ktoré zahŕňali akútny zápal. Novšie údaje však naznačujú, že koncentrácie transkobalamínu sa zvyšujú iba v podmienkach s aktiváciou makrofágov ( 31 , 46 ). Ďalšie stavy, ktoré môžu zvýšiť koncentrácie holoTC, zahŕňajú ochorenia pečene ( 43 , 47 ) a vývoj autoprotilátok proti transkobalamínu ( 48 , 49 ). Musíme však urobiť ďalšie štúdie, aby sme preskúmali vplyv autoprotilátok vo vzťahu k novej generácii testov holoTC.

REFERENČNÉ INTERVALY HoloTC

Ako sme diskutovali vyššie, v referenčnom intervale pre holoTC sa môžu vyskytnúť mierne rozdiely z dôvodu transkobalamínového genotypu, veku a pohlavia ( 9 , 22 , 23 , 26 , 28 ). Hlásené variácie týchto faktorov sú k dnešnému dňu relatívne malé a pred stanovením potreby upravených referenčných intervalov, napríklad podľa veku, pohlavia a rasy, je potrebné, aby sa touto otázkou zaoberali ďalšie štúdie.

Doteraz publikované referenčné intervaly sú zhrnuté v Tab. 1. Zahrnuli sme len údaje o primerane veľkých skupinách zdravých jedincov. Zdá sa, že súčasný konsenzus je, že vhodný je referenčný interval 40–200 pmol/l. Kým nebudú k dispozícii výsledky z ďalších štúdií, lekári a výskumníci by mali potvrdiť tento interval lokálne pred zavedením holoTC do každodennej klinickej praxe alebo interpretáciou výsledkov v populačných štúdiách.

Tab. 1

Vybrané referenčné intervaly pre holotranskobalamín (holoTC) s použitím najbežnejších testov na meranie holoTC ¹

Metóda ²	Ukážka	Referenčný rozsah	n	Odkaz
	μL	pmol/L
Rádioimunoanalýza	400	24–160	105	22
		37–170	303	28
Mikrobiológia	<150	42–160	500	9
ELISA	100	40–150	137	23
Priamy	200	19–130	292	26
		36–220	276	50

Otvoriť v samostatnom okne

¹ ELISA, enzýmová imunoanalýza.

² Rádioimunoanalýza: precipitácia transkobalamínu na guľôčkach potiahnutých protilátkou a meranie vitamínu B-12 s použitím metódy izotopového riedenia. Mikrobiológia: precipitácia transkobalamínu guľôčkami potiahnutými protilátkou a meranie zachyteného vitamínu B-12 s použitím mikrobiologickej metódy. ELISA: meranie holoTC s použitím ELISA po odstránení apotranskobalamínu guľôčkami potiahnutými vitamínom B-12. Priame: meranie holoTC pomocou ELISA s použitím protilátky, ktorá je špecifická pre holoTC.

UŽITOČNOSŤ MERANIA holoTC

Nissen et al ( 51 ) dospeli k záveru, že meranie holoTC a/alebo celkového transkobalamínu je užitočné ako diagnostický nástroj u niekoľkých pacientov s deficitom transkobalamínu. Tento stav vedie k závažným symptómom v ranom detstve a lekári ho musia diagnostikovať čo najskôr, aby sa predišlo trvalému poškodeniu.

Stav vitamínu B-12

Množstvo štúdií predložilo údaje o vzťahu medzi holoTC a celkovými koncentráciami vitamínu B-12 v extrémnom až nedostatočnom príjme vitamínu. Študovali sme zdravých jedincov na dennej perorálnej dávke vitamínu B-12 500 μg a pozorovali sme maximálne zvýšenie holoTC ≈50 % do 3 dní, bez ďalšieho zvýšenia do konca štúdie (84 dní). Vzorec pre vitamín B-12 viazaný na haptokorín bol odlišný. Počiatočná elevácia bola ≈20 %, ale počas celej štúdie sme pozorovali kontinuálny nárast ( 35 ). MMA nepreukázala žiadnu zmenu a zmena tHcy bola pomalšia ako u holoTC ( 52 ). Na druhej strane štúdie na vegánskej populácii s nedostatočným príjmom vitamínu B-12 naznačujú, že holoTC klesá pred zmenami v ostatných markeroch stavu vitamínu B-12 (12 ). Medzi týmito extrémami, holoTC, podobne ako ostatné ukazovatele stavu vitamínu B-12, odráža príjem vitamínu B-12 ( 17 ).

Celkovo vyššie uvedené štúdie naznačujú, že holoTC sa môže ukázať ako najužitočnejšie, ak je cieľom monitorovať populáciu s hraničnou suboptimálnou zásobou vitamínu B-12. Naproti tomu celkový vitamín B-12 môže byť lepší, ak je cieľom monitorovať možnú nadmernú záťaž vitamínu. A nakoniec, ktorýkoľvek z markerov nedostatku vitamínu B-12 sa môže použiť, ak je cieľom rozlíšiť medzi normálnym stavom vitamínu B-12 a zjavným nedostatkom.

Príjem vitamínu B-12

Pozorovanie, že holoTC je markerom akútneho zvýšenia príjmu vitamínu B-12, nás viedlo k vyvinutiu rutinného testu (CobaSorb) na štúdium vychytávania vitamínu B-12. Na vykonanie testu odoberáme vzorky krvi pred a po 1–2 d perorálnom príjme 3-krát 9 μg vitamínu B-12 denne a meriame zvýšenie holoTC. Z analytického hľadiska sme schopní detegovať zvýšenie holoTC ≥10 pmol/l iba vtedy, ak je východisková hodnota holoTC primerane nízka a pôvodne sme odporučili, aby sa test použil len vtedy, ak bola východisková hodnota holoTC <75 pmol/l ( 53 ). V skorej štúdii na kohorte ( n= 17) neschopný absorbovať vitamín B-12 kvôli zdedenému nedostatku buď vnútorného faktora alebo jeho receptora, pozorovali sme, že žiadny z pacientov neabsorboval vitamín B-12, ako bolo posúdené testom CobaSorb. Inými slovami, podľa týchto údajov je citlivosť CobaSorbu 1,00 ( 54 ). Špecifickosť sme vypočítali na 0,98 na základe výsledkov získaných od 57 zdravých jedincov s východiskovou hodnotou holoTC <75 pmol/l ( 53). Neskôr sme vylepšili test CobaSorb, aby sme mohli študovať aj absorpciu vitamínu B-12, ak je základná hodnota holoTC príliš vysoká na to, aby bolo možné použiť pôvodný test. Využili sme pozorovanie, že perorálna dávka vitamínu B-12 sa absorbuje nezmenená (tj ako kyanokobalamín). Na základe tohto pozorovania sme vyvinuli verziu testu CobaSorb, v ktorej meriame zvýšenie množstva kyanokobalamínu viazaného na transkobalamín. Túto verziu testu sme nazvali C-Cobasorb ( 55). Dnes odporúčame použiť CobaSorb na objasnenie toho, či je diagnostikovaný nedostatok vitamínu B-12 spôsobený neschopnosťou vitamín absorbovať, a odporúčame, aby bol test posúdený nasledujúcim spôsobom. Pacienta považujeme za schopného absorbovať vitamín B-12, ak sa holoTC zvýši > 10 pmol/l a > 22 % po 2 dňoch príjmu perorálnej dávky 3-krát 9 μg vitamínu B-12 denne. Odporúčame, aby sa C-CobaSorb vykonal u pacientov s východiskovou hodnotou holoTC > 65 pmol/l a aby sa na základe testu CobaSorb neposúdilo, že absorbujú vitamín B-12 ( 55 ). Zdôrazňujeme, že v súčasnosti sa testy CobaSorb používajú iba na poskytnutie odpovede „áno“ alebo „nie“ súvisiacej s absorpciou vitamínu B-12. Nevieme, či testy budú schopné klasifikovať jednotlivcov s nízkou, ale nie chýbajúcou schopnosťou vstrebávania vitamínu.

Nedostatok vitamínu B-12

My a iní vnímame holoTC ako skorý marker nedostatku vitamínu B-12, ale konečný dôkaz tohto konceptu by si vyžadoval štúdiu, v ktorej by sa sledovala skupina pacientov, pretože ich stav vitamínu B-12 sa posúva z normálneho na zjavný nedostatok. Takáto štúdia nie je uskutočniteľná, pretože by ste mali povinnosť liečiť pacienta hneď, ako sa objavia prvé príznaky nedostatku. Avšak, ako je uvedené v Obrázok 3, poskytujeme nepriame dôkazy, ktoré naznačujú, že holoTC je lepší marker ako vitamín B-12. Analyzovali sme kombinované údaje zo štúdie o starších dospelých žijúcich v komunite ( 56 ) a zo štúdie o pacientoch odoslaných do nemocnice na vyhodnotenie podozrenia na nedostatok vitamínu B-12 ( 32). Obrázok ukazuje, že holoTC zodpovedá za väčšinu zmien vo vitamíne B-12, vyjadrené v relatívnom (horný panel) alebo absolútnom vyjadrení (dolný panel) v skupinách pacientov so zvyšujúcim sa nedostatkom vitamínu B-12, ako sa usudzuje zo zvýšenia MMA hodnoty od 0,25 do >1 μmol. Je zaujímavé, že hladiny holoTC sú znížené, zatiaľ čo celkový obsah vitamínu B-12 sa naďalej zvyšuje v skupinách pacientov bez deficitu vitamínu B-12 podľa hodnôt MMA <0,25 μmol/l. Tento výsledok je v súlade s našimi predchádzajúcimi výsledkami ( 35 ), ktoré ukázali, že dlhodobé zaťaženie vitamínom B-12 má za následok zmenu celkového vitamínu B-12, ale nie holoTC.

OBRÁZOK 3.

Holotranskobalamín (holoTC) a kobalamín (vitamín B-12) vo vzťahu ku kyseline metylmalónovej (MMA). Obrázok ukazuje kombinované údaje od Hvas a Nexo ( 32 ) a Clarke et al ( 56 ). Obrázok obsahuje 1842 súborov údajov rozdelených do tertilov v súlade so zvyšujúcimi sa hodnotami MMA. Os x označuje priemernú hodnotu MMA v každej skupine. Horný panel zobrazuje zlomkovú zmenu v holoTC (•) a vitamíne B-12 viazanom na haptokorín (celkový vitamín B-12 mínus hodnoty holoTC; ○). Na výpočet zlomkovej zmeny sme vydelili priemer pre každú skupinu priemerom pre skupinu s najnižšími hodnotami MMA. Spodný panel zobrazuje absolútne hodnoty holoTC (•), vitamínu B-12 viazaného na haptokorín (○) a celkového vitamínu B-12 (×). Obrázok znázorňuje priemer (± SEM) pre každú skupinu.

Početné štúdie porovnávali účinnosť holoTC s účinkom celkového vitamínu B-12 na identifikáciu pacientov s nedostatkom vitamínu B-12. Väčšina z týchto štúdií použila zvýšenú koncentráciu MMA a možno aj tHcy na identifikáciu jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 a bez neho (Tabuľka 2). Všetky štúdie uvedené v Tabuľka 2, zahŕňali pacientov s normálnou funkciou obličiek a všetky tieto štúdie okrem jednej ukázali, že výkonnosť holoTC je lepšia ako výkonnosť vitamínu B-12, nezávisle od hraničnej hodnoty MMA, ktorú použili na klasifikáciu stavu vitamínu B-12 pacientov ( 32 , 56 – 59 ). Jedna štúdia, ktorá ukázala, že vitamín B-12 bol lepší ako holoTC, zahŕňala len veľmi málo pacientov na hodnotenie holoTC ( 59 ). Niekoľko štúdií u pacientov s poruchou funkcie obličiek ukázalo, že holoTC je u týchto pacientov tiež lepší ( 56 , 58 ). Hoci sa zdá, že holoTC identifikuje pacientov so zvýšenými koncentráciami MMA efektívnejšie ako vitamín B-12, Miller et al ( 60) navrhli, že je vhodnejšie použiť kombináciu oboch parametrov.

TABUĽKA 2

Porovnanie holotranskobalamínu (holoTC) a celkového vitamínu B-12 na diagnostiku nedostatku vitamínu B-12 ¹

Celkový počet subjektov (celkový počet subjektov s nedostatkom vitamínu B-12)	národnosť	Vek	Limity pre MMA (tHcy)	AUC pre holoTC	AUC pre vitamín B-12	Odkaz
		Y	μmol/l
806 (24)	dánčina	>18	>0,75 (>15)	0.90	0.85	32
1651 (70)	Angličtina	>65	>0,75	0.87	0.79	56
1651 (129)	Angličtina	>65	>0,45	0.80	0.73	56
533 (71)	nemecký	18–98	>0,40	—	0.72	59
125 (16)	nemecký	18–98	>0,40	0.66	—	59
759 (174)	nemecký	8–92	>0,30	0.71	0.60	58
204 (68)	nemecky, holandsky	21–73	>0,27	0.88	0.84	57

Otvoriť v samostatnom okne

¹ Limity pre MMA a tHcy označujú hraničné hodnoty, ktoré boli použité na klasifikáciu pacientov ako pacientov s nedostatkom vitamínu B-12. Výskumníci hodnotili výsledky s použitím prevádzkových kriviek prijímača. Plocha pod krivkou (AUC) 1,0 znamená dokonalý test a AUC 0,5 neužitočný test. MMA, kyselina metylmalónová; tHcy, homocysteín.

Fedosov ( 61 ) nedávno použil matematické modelovanie na klasifikáciu stavu vitamínu B-12 pacientov s použitím všetkých 4 markerov nedostatku (holoTC, celkový vitamín B-12, MMA a tHcy). Potom určil, ako dobre by každý marker predpovedal nedostatok vitamínu B-12, a ukázal, že holoTC [oblasť pod operačnou krivkou prijímača (AUC) = 0,93] je podobný MMA (AUC = 0,92) a lepší ako celkový vitamín B-12 (AUC = 0,88) a tHcy (AUC = 0,87).

ZÁVERY

Pred viac ako 20 rokmi viedli poznatky o fyziológii vitamínu B-12 k názoru, že holoTC môže byť citlivým markerom skorého nedostatku vitamínu B-12. Odvtedy meranie holoTC dospelo. Dnes môžeme konštatovať, že holoTC sa javí ako vhodnejší na diagnostiku nedostatku vitamínu B-12 ako celkový vitamín B-12. Do dnešného dňa však holoTC nezískal širokú klinickú akceptáciu, s najväčšou pravdepodobnosťou kvôli nákladom na test a obmedzenej dostupnosti. Na základe údajov, ktoré uvádzame v tomto prehľade, predpokladáme, že holoTC bude tiež vynikajúcim markerom na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populácii. V súčasnosti existuje silná potreba štúdií, ktoré môžu potvrdiť alebo vyvrátiť túto predpoveď.

Poďakovanie

Povinnosti autorov boli nasledovné—SK: napísal prvý návrh hlavnej časti článku; a EH-L: bol zodpovedný za vyhľadávanie literatúry a napísal prvý návrh, ktorý pokrýval genetické determinanty pre transkobalamín. Obaja autori prispeli k nepretržitej práci a schválili konečný návrh. Ani jeden z autorov nemal žiadne konflikty záujmov, ktoré by mohol vyhlásiť.

LITERATÚRA

1. Herzlich B, Herbert V. Deplécia sérového holotranskobalamínu II. Skorý príznak negatívnej rovnováhy vitamínu B12 . Lab Invest 1988; 58 :332–7 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

2. Nexo E, Andersen J. Nenasýtený a kobalamínom nasýtený transkobalamín I a II v normálnej ľudskej plazme . Scand J Clin Lab Invest 1977; 37 :723–8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

3. Hom BL, Olesen HA. Plazmatický klírens 57-kobaltom značeného vitamínu B12 viazaného in vitro a in vivo na transkobalamín I a II . Scand J Clin Lab Invest 1969; 23 : 201 – 11 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

4. Nexo E, Gimsing P. Premena jódom a kobalamínom značeného transkobalamínu I a jódom značeného albumínu u ľudí . Scand J Clin Lab Invest 1975; 35 : 391 – 8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

5. Kolhouse JF, Kondo H, Allen NC, Podell E, Allen RH. Analógy kobalamínu sú prítomné v ľudskej plazme a môžu maskovať nedostatok kobalamínu, pretože súčasné testy riedenia rádioizotopov nie sú špecifické pre skutočný kobalamín . N Engl J Med 1978; 299 :785–92 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

6. Hardlei TF, Nexo E. Nový princíp merania kobalamínu a korrinoidov, používaný na štúdie analógov kobalamínu na sérovom haptokoríne . Clin Chem 2009; 55 : 1002 – 10 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

7. Carmel R. Nedostatok R-spojiva. Klinicky benígna príčina pseudodeficiencie kobalamínu . JAMA 1983; 250 : 1886 – 90 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

8. Morkbak AL, Pedersen JF, Nexo E. Meranie kobalamín viažuceho proteínu haptokorínu nezávislé od glykozylácie . Clin Chim Acta 2005; 356 : 184 – 90 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

9. Refsum H, Johnston C, Guttormsen AB, Nexo E. Holotranskobalamín a celkový transkobalamín v ľudskej plazme: stanovenie, determinanty a referenčné hodnoty u zdravých dospelých . Clin Chem 2006; 52 : 129 – 37 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

10. Carmel R. Biomarkery stavu kobalamínu (vitamín B-12) v epidemiologickom prostredí: kritický prehľad kontextu, aplikácií a výkonnostných charakteristík kobalamínu, kyseliny metylmalónovej a holotranskobalamínu II . Am J Clin Nutr 2011; 94 ( suppl ):348S–58S [ bezplatný článok PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]

11. Herbert V. Stav stagingu vitamínu B-12 (kobalamín) u vegetariánov . Am J Clin Nutr 1994; 59 ( suppl ):1213S–22S [ PubMed ] [ Google Scholar ]

12. Lloyd-Wright Z, Hvas AM, Møller J, Sanders TA, Nexo E. Holotranskobalamín ako indikátor nedostatku vitamínu B12 v potrave . Clin Chem 2003; 49 :2076–8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

13. Herrmann W, Schorr H, Obeid R, Geisel J. Stav vitamínu B-12, najmä koncentrácie holotranskobalamínu II a kyseliny metylmalónovej a hyperhomocysteinémia u vegetariánov . Am J Clin Nutr 2003; 78 : 131 – 6 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

14. Refsum H, Smith AD, Ueland PM, a kol. Fakty a odporúčania o stanovení celkového homocysteínu: odborný posudok . Clin Chem 2004; 50 : 3 – 32 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

15. Green R, Miller JW. Nedostatok vitamínu B12 je dominantnou nutričnou príčinou hyperhomocysteinémie u populácie obohatenej kyselinou listovou . Clin Chem Lab Med 2005; 43 :1048–51 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

16. Hvas AM, Nexo E. Diagnostika a liečba nedostatku vitamínu B12 – aktualizácia . Haematologica 2006; 91 : 1506 – 12 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

17. Bor MV, von Castel-Roberts KM, Kauwell GP a kol. Denný príjem 4 až 7 μg vitamínu B-12 v potrave je spojený so stabilnými koncentráciami biomarkerov súvisiacich s vitamínom B-12 u zdravej mladej populácie . Am J Clin Nutr 2010; 91 :571–7 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

18. Begley JA, sála CA. Meranie plazmatických proteínov viažucich vitamín B12. I. Technika . Krv 1975; 45 :281–6 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

19. van Kapel J, Wouters NM, Lindemans J. Aplikácia sefarózy konjugovanej s heparínom na meranie kobalamínom nasýteného a nenasýteného transkobalamínu II . Clin Chim Acta 1988; 172 : 297 – 310 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

20. Lindgren A, Kilander A, Bagge E, Nexo E. Holotranskobalamín: citlivý marker malabsorpcie kobalamínu . Eur J Clin Invest 1999; 29 :321–9 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

21. Lindemans J, Schoester M, van Kapel J. Aplikácia jednoduchého imunoadsorpčného testu na meranie nasýteného a nenasýteného transkobalamínu II a R-väzbov . Clin Chim Acta 1983; 132 : 53 – 61 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

22. Ulleland M, Eilertsen I, Quadros EV, a kol. Priamy test na kobalamín viazaný na transkobalamín (holo-transkobalamín) v sére . Clin Chem 2002; 48 :526–32 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

23. Nexo E, Christensen AL, Hvas AM, Petersen TE, Fedosov SN. Kvantifikácia holo-transkobalamínu, markera nedostatku vitamínu B12 . Clin Chem 2002; 48 :561–2 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

24. Morkbak AL, Heimdal RM, Emmens K, a kol. Hodnotenie technickej výkonnosti nových testov holotranskobalamínu (holoTC) v multicentrickom európskom demonštračnom projekte . Clin Chem Lab Med 2005; 43 : 1058 – 64 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

25. Orning L., Rian A., Campbell A. a kol. Charakterizácia monoklonálnej protilátky so špecifickosťou pre holo-transkobalamín . Nutr Metab (Londýn) 2006; 3 :3. [ bezplatný článok PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]

26. Brady J, Wilson L, McGregor L, Valente E, Orning L. Aktívny B12: rýchly, automatizovaný test na holotranskobalamín na analyzátore Abbott AxSYM . Clin Chem 2008; 54 : 567 – 73 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

27. Bamonti F, Moscato GA, Novembrino C, a kol. Stanovenie sérových koncentrácií holotranskobalamínu testom AxSYM active B(12): hraničné hodnotenie v klinickom laboratóriu . Clin Chem Lab Med 2010; 48 : 249 – 53 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

28. Loikas S, Löppönen M, Suominen P, a kol. RIA pre sérový holo-transkobalamín: vyhodnotenie metódy v klinickom laboratóriu a referenčný interval . Clin Chem 2003; 49 : 455 – 62 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

29. Hvas AM, Gravholt CH, Nexo E. Cirkadiánna variácia holo-transkobalamínu (holo-TC) a príbuzných markerov . Clin Chem Lab Med 2005; 43 : 760–4 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

30. von Castel-Roberts KM, Morkbak AL, Nexo E, et al. Holo-transkobalamín je indikátorom absorpcie vitamínu B-12 u zdravých dospelých s adekvátnym stavom vitamínu B-12 . Am J Clin Nutr 2007; 85 : 1057 – 61 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

31. Nexo E, Christensen AL, Petersen TE, Fedosov SN. Meranie transkobalamínu pomocou ELISA . Clin Chem 2000; 46 :1643–9 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

32. Hvas AM, Nexo E. Holotranskobalamín – test prvej voľby na diagnostiku včasného nedostatku vitamínu B12? J Intern Med 2005; 257 : 289–98 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

33. Morkbak AL, Hvas AM, Milman N, Nexo E. Holotranskobalamín zostáva počas tehotenstva nezmenený. Pozdĺžne zmeny kobalamínov a ich väzbových proteínov počas tehotenstva a po pôrode . Haematologica 2007; 92 :1711–2 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

34. Murphy MM, Molloy AM, Ueland PM a kol. Longitudinálna štúdia vplyvu tehotenstva na stav kobalamínu matky a plodu u zdravých žien a ich potomkov . J Nutr 2007; 137 :1863–7 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

35. Nexo E, Hvas AM, Bleie Ø, et al. Holo-transkobalamín je skorým markerom zmien v homeostáze kobalamínu. Randomizovaná placebom kontrolovaná štúdia . Clin Chem 2002; 48 :1768–71 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

36. Nexo E, MUDr. Hollenberg. Charakterizácia časticového a rozpustného akceptora pre transkobalamín II z ľudskej placenty a králičej pečene . Biochim Biophys Acta 1980; 628 : 190 – 200 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

37. Quadros EV, Nakayama Y, Sequeira JM. Väzbové vlastnosti ľudského receptora pre bunkový príjem vitamínu B12 . Biochem Biophys Res Commun 2005; 327 :1006–10 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

38. Quadros EV, Nakayama Y, Sequeira JM. Proteín a gén kódujúci receptor pre bunkové vychytávanie kobalamínu viazaného na transkobalamín . Krv 2009; 113 : 186–92 [ bezplatný článok PMC ] [ PubMed ] [ Študovňa Google ]

39. Li N, Sood GK, Seetharam S, Seetharam B. Polymorfizmus ľudského transkobalamínu II: substitúcia prolínových a/alebo glutamínových zvyškov arginínom . Biochim Biophys Acta 1994; 1219 : 515 – 20 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

40. Castro R., Barroso M., Rocha M. a kol. Polymorfizmus TCN2 776CNG koreluje s dodaním vitamínu B(12) do buniek u zdravých dospelých populácií . Clin Biochem 2010; 43 : 645–9 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

41. Garrod MG, Allen LH, Haan MN, Green R, Miller JW. Genotyp transkobalamínu C776G modifikuje asociáciu medzi vitamínom B12 a homocysteínom u starších Hispáncov . Eur J Clin Nutr 2010; 64 :503–9 [ PMC bezplatný článok ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]

42. Platica O, Janeczko R, Quadros EV, Regec A, Romain R, Rothenberg SP. Sekvencia cDNA a odvodená sekvencia aminokyselín ľudského transkobalamínu II vykazujú homológiu s vnútorným faktorom potkana a ľudským transkobalamínom I. J Biol Chem 1991; 266 :7860–3 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

43. Carmel R, Vasireddy H, Aurangzeb I, George K. Vysoké hladiny kobalamínu v sére v klinickom prostredí-klinické asociácie a zmeny holo-transkobalamínu . Clin Lab Haematol 2001; 23 : 365 – 71 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

44. Nexø E. Transkobalamín I a iné ľudské R-väzbové látky: čistenie, štrukturálne, spektrálne a fyziologické štúdie . Scand J Haematol 1978; 20 : 221 – 36 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

45. Loikas S, Koskinen P, Irjala K a kol. Porucha funkcie obličiek ohrozuje použitie celkového homocysteínu a kyseliny metylmalónovej, ale nie celkového vitamínu B12 a holotranskobalamínu pri skríningu nedostatku vitamínu B12 u starších ľudí . Clin Chem Lab Med 2007; 45 :197–201 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

46. Moller HJ, Moestrup SK, Weis N, et al. Makrofágové sérové markery pri pneumokokovej bakteriémii: Predikcia prežitia pomocou rozpustného CD163 . Crit Care Med 2006; 34 :2561–6 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

47. Baker H, Leevy CB, DeAngelis B, Frank O, Baker ER. Zmeny kobalamínu (vitamín B12) a holotranskobalamínu v plazme a pečeňovom tkanive u alkoholikov s ochorením pečene . J Am Coll Nutr 1998; 17 :235–8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

48. Skouby AP, Hippe E, Olesen H. Väzbová kapacita protilátok proti transkobalamínu II a B12 u pacientov liečených hydroxokobalamínom . Krv 1971; 38 :769–74 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

49. Carmel R, Tatsis B, Baril L. Cirkulujúca protilátka proti transkobalamínu II spôsobujúca zadržiavanie vitamínu B12 v krvi . Krv 1977; 49 :987–1000 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

50. Aarsetøy H, Valente E, Reine A, Mansoor MA, Grundt H, Nilsen DW. Holotranskobalamín a kyselina metylmalónová ako prognostické markery po akútnom infarkte myokardu . Eur J Clin Nutr 2008; 62 : 411 – 8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

51. Nissen PH, Nordwall M, Hoffmann-Lücke E, Sorensen BS, Nexo E. Nedostatok transkobalamínu spôsobený heterozygotnosťou zlúčenín pre dve nové mutácie v géne TCN2: štúdia dvoch postihnutých súrodencov, ich brata a ich rodičov . J Inherit Metab Dis (Epub pred tlačou 6. júla 2010) [ PubMed ] [ Google Scholar ]

52. Bleie Ø, Refsum H, Ueland PM, et al. Zmeny v koncentráciách bazálnej a postmetionínovej záťaže celkového homocysteínu a cystationínu po intervencii vitamínom B. Am J Clin Nutr 2004; 80 : 641–8 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

53. Hvas AM, Morkbak AL, Nexo E. Plazmatický holotranskobalamín v porovnaní s plazmatickými kobalamínmi na hodnotenie absorpcie vitamínu B12; optimalizácia testu absorpcie nerádioaktívneho vitamínu B12 (CobaSorb) . Clin Chim Acta 2007; 376 :150–4 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

54. Bor MV, Cetin M, Aytaç S, Altay C, Nexo E. Nerádioaktívny test absorpcie vitamínu B12 hodnotený u kontrol a u pacientov s dedičnou malabsorpciou vitamínu B12 . Clin Chem 2005; 51 :2151–5 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

55. Hardlei TF, Mørkbak AL, Bor MV, Bailey LB, Hvas AM, Nexo E. Hodnotenie absorpcie vitamínu B(12) na základe akumulácie perorálne podávaného kyanokobalamínu na transkobalamíne . Clin Chem 2010; 56 :432–6 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

56. Clarke R, Sherliker P, Hin H, a kol. Detekcia nedostatku vitamínu B12 u starších ľudí meraním vitamínu B12 alebo aktívnej frakcie vitamínu B12, holotranskobalamínu . Clin Chem 2007; 53 :963–70 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

57. Herrmann W, Obeid R, Schorr H, Geisel J. Funkčný deficit vitamínu B12 a stanovenie holotranskobalamínu v rizikových populáciách . Clin Chem Lab Med 2003; 41 : 1478 – 88 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

58. Obeid R, Herrmann W. Holotranskobalamín v laboratórnej diagnostike deficitu kobalamínu v porovnaní s celkovým kobalamínom a kyselinou metylmalónovou . Clin Chem Lab Med 2007; 45 :1746–50 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

59. Schrempf W, Eulitz M, Neumeister V, Siegert G, Koch R, Reichmann H, Storch A. Užitočnosť merania vitamínu B(12) a jeho aktívnej frakcie, holotranskobalamínu, pri neurologických syndrómoch nedostatku vitamínu B(12) . J Neurol (Epub pred tlačou 2. októbra 2010) [ PubMed ] [ Google Scholar ]

60. Miller JW, Garrod MG, Rockwood AL, a kol. Meranie celkového vitamínu B12 a holotranskobalamínu, jednotlivo a v kombinácii, pri skríningu metabolického nedostatku vitamínu B12 . Clin Chem 2006; 52 : 278 – 85 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

61. Fedošov SN. Metabolické príznaky nedostatku vitamínu B(12) u ľudí: výpočtový model a jeho dôsledky pre diagnostiku . Metabolizmus 2010; 59 :1124–38 [ PubMed ] [ Google Scholar ]

Články z The American Journal of Clinical Nutrition sú tu poskytnuté s láskavým dovolením Americkej spoločnosti pre výživu